目的建立新的2′-O,3′-O,5′-O-三乙酰基-N-(3-羟基苯基)腺苷含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱为COSMOSIL C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为冰醋酸溶液(量取1000mL水,加入2mL冰醋酸,混匀)-乙腈(60:40)。检测波长为300nm;流速为每分钟1.0mL;柱温为30℃;进样体积10μL。结果专属性试验中溶剂对本品含量测定无干扰;在强制降解试验中主峰与相邻杂质峰的分离度均大于1.5,主峰纯度匹配值均≥990,物质平衡均在90%~110%范围内;线性与范围试验表明本品在0.1mg·mL-1~0.3mg·mL-1浓度范围内主成分峰面积具有良好的线性关系(r=1.000 0);在精密度试验中,进样精密度RSD为0.05%、重复性RSD为0.4%、中间精密度RSD为0.6%,表明精密度良好;溶液稳定性试
验表明供试品溶液和对照品溶液于25℃下放置24 h稳定性良好;回收率在相当于供试品溶液浓度的百分比为80%~120%范围内,回收率为99.2%(n=9),RSD为0.3%,回收率良好;耐用性试验表明,色谱条件的微小变动,测定结果不受影响。结论 所建立的含量测定方法简单可靠,专属性强,线性与范围、精密度、准确度均良好,耐用性范围广,含量测定准确度高,能更好地实现本品的含量控制。
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